Human Angiopoietin-1 ELISA Kit (Human Angiopoietin-1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人促血管生成素1酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清或细胞培养上清液中的Angiopoietin-1的ELISA试剂盒。

Human Angiopoietin-1 ELISA Kit检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为126pg/ml，与人Angiopoietin-2、Angiopoietin-4、小鼠Angiopoietin-3均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

人促血管生成素1 (Angiopoietin-1, Ang-1)是一种分泌型糖蛋白，能够促进血管生成。Ang-1属于生长因子家族，该家族中还包括Ang-2和Ang-4。已知Ang-1具有498个氨基酸分子，并且具有典型的结构特征，其具有N端卷曲螺旋结构域和C端纤维蛋白原结构域。人Ang-1和小鼠Ang-1具有97%的氨基酸同源性，Ang-1和Ang-2具有60%的序列相似性，并且均能够作用于酪氨酸激酶受体Tie-2。整合素也参与调节Ang-1和Ang-2的生物活性。目前已知至少存在3种Ang-1的选择性剪切变体，其中2种都被证实不能激活Tie-2受体，并且可能会抑制Ang-1的生物活性。Ang-1广泛表达于小鼠胚胎和成人组织中，例如血管内皮细胞、巨核细胞和血小板上。Ang-1通常以同源三聚体或高阶寡聚蛋白复合物的形式存在，有时也会与Ang-2行成异质二聚体复合物。

Ang-1参与调节血管发育、重构及成熟过程。Ang-2/Tie-2通过激活PI3K/AKT信号通路实现对细胞存活的调节，调节细胞迁移时会涉及到PI3K、FAK和PAK的活化，而在调节细胞萌芽时则伴随着PI3K和FAK的激活以及血纤维蛋白溶酶和MMP-2的释放。Ang-1的缺失具有胚胎致死性，并且会伴随着心脏发育缺陷和血管复杂性降低。另外，Ang-1在脑和皮肤中的过表达会导致血管的过度生成。尽管其同家族成员Ang-2对于血管生长的作用十分复杂并且具有一定的环境依赖性，但在一些特定条件下，Ang-2明显表现出了对于Ang-1/Tie-2活性的抑制作用。

除了影响血管生长外，Ang-1也同样参与调节一些其他的生理过程。例如，Ang-1/Tie-2通路能够帮助造血干细胞在骨髓中维持静息状态；同时还能够促进嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的粘附和迁移，调节血管渗透性。在神经系统中，Ang-1能够促进神经元生长、存活和树突形成。肿瘤相关的血管生成会影响Ang-1和Ang-2浓度变化，有研究表明肿瘤和高血压都会造成游离Ang-1浓度升高。

Human Angiopoietin-1 ELISA Kit采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Angiopoietin-1的浓度，其原理见图1。人Angiopoietin-1特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人Angiopoietin-1会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Angiopoietin-1抗体后，生物素化抗人Angiopoietin-1抗体与人Angiopoietin-1结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Angiopoietin-1浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
Human ApoE ELISA Kit注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。