肌酐(Cr)测定试剂盒苦味酸法说明书

分光光度法50管/48样

注   意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：肌酐是在肌肉中从磷酸肌酸通过自发和不可逆转化而形成的，除非肌肉质量有大的变化，通常情况所形成的肌酐量是相当恒定的。游离肌酐的循环量完全依赖于它的排泄速度，从而测定尿液，血清或血浆中的肌酐量，可用于肾功能检查。肌酐含量的增高常见于:慢性肾衰竭时排泄量的减少及肢端肥大症。

测定原理：肌酐与过量苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色苦味酸肌酐。在波长490nm处有最大吸收峰，在一定的时间内测定该复合物，即可计算出样本中肌酐的含量，并可避免干扰。

肌酐+碱性苦味酸————肌酐苦味酸复合物

自备仪器和用品：

可见分光光度计、普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1 瓶，4℃保存，临用前过滤。

试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂三：10x 标准液×1 瓶，4℃保存，临用前，蒸馏水10倍稀释1x标准液，终浓度为0.1 mg/ml。

*工作液配置：试剂二：试剂一 = 1：10（临用前配置，用多少配多少）。

样本收集：

1.血清，血浆，血清或血浆中的肌酐在 2-8℃下可保存 24 小时。

2.尿液:试验前将新鲜尿液用蒸馏水作1/50稀释，测定结果乘以50。

 肌酐(Cr)测定试剂盒苦味酸法

测定操作：

1. 分光光度计预热30min，调节波长到490nm，蒸馏水调零。

2，按下表添加样本试剂，充分混匀，置37℃水浴30秒钟后，选择波长490nm，以空白管校零读取起始吸光度(A1)，90秒钟后读取终末吸光度(A2)

备注:可根据使用仪器的不同，恒比例改变试剂与样本的量。

注意：空白管只需要做一次

肌酐(Cr)测定试剂盒苦味酸法

计算公式：

 肌酐(Cr)测定试剂盒苦味酸法

注意事项：

1、本方法的最低检出浓度为0.03 g/L(取样体积为0.1 mL)、线性范围为O~l.0g/L r = O.9995, 精密度：相对标准偏差为0.38%~2.2%(浓度为0.2~1.0g/L.n =6), 准确度：尿样加标平均回收率为93% ~105% (肌酐浓度为0.35~0.57g/Ln = 6)。本法测定中的最小取样量为50uL。

2、尿样中含有0.1mg/L的镍、汞、硒、钒，0.2mg/L的铬，0.3mg/L的杀虫脒，0.4mg/L的镉、对硝基酚，0.6mgL的铅、砷，1mg/L的马尿酸及甲基马尿酸，16mg/L的2-硫代噻唑烷-4-羧酸，2mg/L的氟，3mg/L的酚，100mg/L的三氯乙酸，400mg/的扁桃酸，1000mg/L 的苯乙醛酸，不干扰测定。

3、反应温度、苦味酸纯度及其浓度、氢氧化钠浓度均对测定值有影响。反应温度必须控制在30℃以下。加水至10mL混匀后应尽快完成标准和样品的测定，从最先开始测定至最后一个样品结束，整个比色过程必须控制在30min内完成。

4、血红蛋白(0.1mg/L)，胆红素(10mg/dL)，前体及蛋白质均不干扰反应，但高浓度的还原物质会影响测定结果。

5、本产品在岛津-UV1601PC 型仪器上通过第三方检测，用于其他仪器需进行验证。

6、中华人民共和国卫生行业标准 尿中肌酐分光光度测定方法

（Urine-Determination of creatinine -Spectrophotometric method）

WS/T 9 7 - 1 9 9 6

参考文献：

1.Fabiny DLetal.ClinChem1971:17:696

2.Young DS,etal.ClinChem1975:21:286-288

肌酐(Cr)测定试剂盒苦味酸法